تاثیر افزودن روغن بذر گل مغربی به رقیق کننده انجمادی بر پایه تریس بر کیفیت اسپرم قوچ رومانوف پس از انجماد و یخ گشایی

سابقه و هدف: تحقیقات نشان داده اند که فرآوری و انجماد با تولید رادیکالهای آزاد سبب کاهش جنبایی، زندهمانی و قدرت باروری اسپرم می شود. بنابراین استفاده از یک ترکیب با ویژگی آنتی اکسیدانتی طی این فرآیند ضروری به نظر می رسد. روغن بذرگل مغربی به دلیل داشتن ترکیبات فنولی دارای ویژگی آنتی اکسیدانتی است. هدف از پژوهش حاضر، بررسی اثر افزودن روغن بذر گل مغربی به رقیق کننده انجمادی بر کیفیت اسپرم قوچ پس از فرآیند انجماد و یخ گشایی است.مواد و روش ها: در این تحقیق از منی ۵ راس قوچ رومانوف بالغ با میانگین سنی ۳ تا ۴ سال و میانگین وزنی ۶۰ تا ۶۵ کیلوگرم استفاده شد. جمع آوری منی با استفاده از واژن مصنوعی به صورت هفته ای دو بار انجام گرفت. برای افزودن روغن به گروه های تیماری از تویین-۸۰ استفاده شد. تیمار های آزمایشی شامل تیمار شاهد بدون روغن گل مغربی، تیمار ۱ دارای ۲۵ میکرولیتر، تیمار ۲ دارای ۵۰ میکرولیتر و تیمار ۳ دارای ۱۰۰ میکرولیتر از روغن گل مغربی بود. نمونه های منی پس از جمع آوری به آزمایشگاه منتقل شد و ازنظر حجم، غلظت و جنبایی پیش رونده اسپرم بررسی شدند. درنهایت، نمونه های منی با رقیق کننده بر پایه تریس _ لستین سویا رقیق سازی و منجمد شد. پس از یخ گشایی فراسنجه های جنبایی کل و پیش رونده، درصد زنده مانی، یکپارچگی غشاء، فعالیت میتوکندریایی و پراکسیداسیون لیپیدی اسپرم تعیین گردید. یافته ها: نتایج نشان داد که سطح ۲۵ میکرولیتر روغن بذر گل مغربی توانست جنبایی کل اسپرم را نسبت به گروه کنترل بهبود ببخشد و در دیگر تیمارهای آزمایشی تفاوت معنی داری نسبت به گروه شاهد مشاهده نشد. در فراسنجه جنبایی پیش رونده بین تیمارهای ۲۵ و ۵۰ میکرولیتر با گروه شاهد تفاوت معنی داری مشاهده نشد ولی این فراسنجه در تیمار ۱۰۰ میکرو لیتر نسبت به گروه های دیگر به طور معنی داری تفاوت نشان داد )۰۱/۰> .(Pافزودن سطوح ۲۵ و ۵۰ میکرولیتر روغن گل مغربی به رقیق کننده، صفت یکپارچگی غشا را نسبت به سطح ۱۰۰ میکرولیتر و تیمار شاهد بهبود داد(۰۱/۰>P) ولی این بهبود در تیمار ۲۵ میکرولیتر نسبت به سطح ۵۰ میکرولیتر بیشتر بود(۰۱/۰>P). نتایج حاصل از ارزیابی فعالیت میتوکندری نشان داد که بیشترین درصد اسپرم دارای میتوکندری فعال در گروه های ۲۵ و ۵۰ میکرولیتر بود(۰۱/۰>P). نتایج حاصل از پر اکسیداسیون لیپیدی نشان داد که کمترین مقدار تولید مالون دی آلدئید مربوط به تیمار ۲۵ میکرولیتر می باشد ولی با تیمار شاهد اختلاف معنی داری مشاهده نشد. نتایج حاصل از آزمایش آپوپتوز نشان داد که افزودن سطوح ۲۵ و ۵۰ میکرولیتر روغن گل مغربی باعث کاهش میزان آپوپتوز نسبت به گروه شاهد و سطح ۱۰۰ میکرولیتر روغن گل مغربی گردید(۰۱/۰>P) .همچنین زنده مانی در تیمار ۲۵و ۵۰ میکرولیتر نسبت به دیگر تیمارها به طور معنی داری بالاتر بود(۰۱/۰>P). درنهایت اسپرم های مرده در تیمار ۲۵ میکرو لیتر نسبت به دیگر گروه های آزمایشی کمتر بود و همین امر سبب اختلاف معنی دار این صفت در این سطح نسبت به دیگر سطوح گردید(۰۱/۰>P).نتیجه گیری: به طورکلی افزودن روغن گل مغربی در رقیق کننده انجمادی منجر به افزایش جنبایی، قابلیت زنده مانی و سلامت غشاء پلاسمایی و کاهش آپوپتوز اسپرمها پس از انجماد-یخ گشایی می شود. با در نظر گرفتن همه فراسنجه های اندازه گیری شده، گروه مربوط به ۲۵ میکرولیتر نسبت به سایر سطوح اثر حفاظتی بیشتری از خود نشان داد.