بررسی تکمیلی ، تعیین خصوصیات مولکولی برخی لوتیو ویروس های همراه با عارضه زردی نخود

در سالهای اخیر بروز علایم زردی قبل از مراحل گلدهی در گیاه نخود Cicer arietinum به عنوان یکی از عارضه های شایع در مزارع دیم نخود استان های کرمانشاه ، لرستان و همچنین مناطق مهم کاشت این محصول گزارش شده است. مطالعات مقدماتی حاکی از بروز آلودگی های ویروسی در برخی از مزارع نخود بوده است. عوامل ویروسی از خانواده لوتیوویریده ، جنس لوتیو ویروس ها (Luteoviruses ) دارای بیشترین میزان پراکنش در مزارع گزارش شده است. در فصل زراعی سال 95-1394 تعداد 170 نمونه ی برگی بصورت انتخابی و تصادفی از گیاه نخود قبل از شرایط گلدهی با علایم زردی، کوتولگی ،توقف رشد، سرخی و برنزه شدن حاشیه برگ و ریز برگی از برخی از مناطق کرمانشاه، لرستان و همدان جمع آوری گردید. نمونه های نخود دارای علایم زردی با استفاده از آزمون های سرولوژیکی الایزا (Elisa ) ولکه گذاری بافتی (Tissue-blot) با آنتی سرم های چند همسانه ای اختصاصی مورد سنجش قرار گرفتند. آلودگی برخی از نمونه ها به ویروس پیچیدگی برگ لوبیا BLRV (3/52%)، ویروس کوتولگی سویا SbDV (9/32%)، ویروس کلروز لکه ای نخودCpCSV (17%)، ویروس موزاییک زرد چغندرقند BWYV (8/18%) و ویروس زردی نکروتیک باقلا FbNYV(Nanovirus) (7%) مثبت ارزیابی گردید. از بین جدایه هایی که در آزمون های سرولوژیکی مثبت ارزیابی شدند ، با توجه به اهمیت، هشت جدایه غالب از ویروس BLRVو CpCSV به منظور مطالعات مولکولی (RT-PCR) انتخاب گردید. مقایسه توالی جدایه های BLRV مورد بررسی در این تحقیق با توالی های موجود در بانک جهانی ژن NCBI رابطه نزدیکی (98%) بین جدایه های مورد مطالعه با جدایه های BLRV از آرژانتین، آمریکا، آلمان، اسپانیا و لیبی مشاهده گردید. نتایج حاصل از درخت فیلوژنتیکی حاکی از آن بود که جدایه (Ir-F-Lor-05) بالاترین شباهت (4/99%) را با جدایه های (manfredi، BLRV-43، toxon-12041وpBLR-cp38) از کشورهای آرژانتین، اسپانیا و آمریکا را داشت. همچنین نتایج حاصل از مقایسه توالی نوکلیوتیدی جدایه های CpCSV مورد بررسی در این تحقیق نیز با توالی های موجود در NCBI ارتباط نزدیکی را با جدایه هایی از جمهوری آذربایجان، ایران، تونس و سوریه در سطح 98% را نشان داد. از این میان بالاترین شباهت (8/97%) را با جدایه های (Tuc-215-201 وAz296-07) از کشور آذربایجان و تونس مشاهده گردید.واژه های کلیدیآزمون پی سی ار، سرولوژیک ، خصوصیات مولکولی، ویروس های جنس لوتیو،زردی