تعیین خصوصیات بیولوژیکی و مولکولی توسپوویروس نکروز نقطه ای گل حنا‭(INSV-Tospovirus) ‬جدا شده از گیاهان زینتی ایران

در این تحقیق تعداد ‮‭581‬ نمونه برگی از ‮‭58‬ گونه زینتی مختلف با نشانه های ناشی از آلودگی به ویروس نکروز نقطه ای گل حنا‭(Impatiens necrotic spot virus‬، ‭INSV) ‬، لکه های نکروزه برگی، کلروز و کوتولگی شبیه به آلودگی به ‭INSV ‬از مناطق عمده کشت و پرورش گیاهان زینتی در 5 استان کشور (گیلان ‮‭128‬ نمونه، مازندران ‮‭159‬ نمونه، تهران ‮‭122‬ نمونه، مرکزی ‮‭108‬ نمونه، دزفول ‮‭64‬ نمونه) جمع آوری و توسط آزمون سرولوژیکی الایزا ‭(DAS-ELISA) ‬از نظر آلودگی به این ویروس بررسی شدند. تعدادی از نمونه هایی که در این آزمونها از جهت آلودگی به ویروس ‭INSV‬مثبت تلقی شدند، توسط بافر مایه زنی بر روی گیاهان محک مناسب منتقل شده و با استفاده از میزبانهای تک لکه، نسبت به تهیه نمونه خالص بیولوژیکی اقدام گردید. نتایج به دست آمده نشانگر آلودگی ‮‭20/13‬ درصد نمونه های جمع آوری شده به ویروس نکروز نقطه ای گل حنا و انتشار آلودگی در 4 استان از مناطق مورد بررسی بود. بیشترین آلودگی به ترتیب مربوط به استان های مرکزی با 7/%‮‭28‬ آلودگی، تهران 5/%‮‭24‬ آلودگی ، مازندران ‮‭01‬/%‮‭22‬ آلودگی و گیلان ‮‭40‬/%‮‭16‬ آلودگی بود و هیچیک از نمونه های مورد بررسی مربوط به استان خوزستان به ویروس ‭INSV ‬آلوده نبودند. طبق بررسی های انجام شده در این تحقیق از ‮‭58‬ گونه زینتی مورد بررسی ‮‭33‬ گونه به ویروس ‭INSV ‬آلودگی نشان دادند. آلودگی برخی از نمونه های دارای واکنش مثبت به ویروس ‭INSV ‬در سنجش الایزا، از طریق آزمون ‭RT-PCR ‬و بکارگیری جفت پرایمرهای اختصاصی و طراحی شده برای قسمت نوکلیوکپسید مورد بررسی قرار گرفت. ناحیه ای از ژن ‭(NC) ‬با اندازه ‮‭777‬ جفت باز تکثیر و تعیین توالی گردید. توالی مربوط به نمونه های پیله آ و فیلودندرون از محلات، داودی از مازندران، اسپات از گیلان، شمعدانی از تهران با توالی جدایه های موجود در ‭Genbank ‬مورد مقایسه قرار گرفت. جدایه های ایرانی همگی در یک گروه قرار گرفته و بیشترین شباهت را با نمونه های هلند، ایتالیا و امریکا داشتند. واژه های کلیدی: آزمون الایزا، ‭RT-PCR‬، بیولوژی، گیاهان زینتی، ‭INSV